Предложена новая генная терапия для «людей-бабочек»

Буллезный эпидермолиз — группа тяжелых наследственных заболеваний, для которых характерна гиперчувствительность и ранимость кожи, повреждения в ответ на прикосновения незначительной силы. В СМИ больных буллезным эпидермолизом часто называют «людьми-бабочками». Лечение в основном симптоматическое, хотя в 2017 году была публикация о пересадке пациенту трансгенной кожи, выращенной из его собственных клеток с заменой гена LAMB3.

Буллезный эпидермолиз генетически гетерогенен, в частности, рецессивный дистрофический буллезный эпидермолиз (РДБЭ) вызывается мутациями в другом гене, COL7A1, кодирующем коллаген типа VII (C7), причем тяжесть заболевания зависит от типа мутации. C7 — основной компонент фибрилл заякоривания в зоне базальной мембраны, в норме он обеспечивает связь между эпидермисом и нижележащими слоями кожи.

Одобренных методов лечения этого заболевания в настоящее время не существует. Однако исследователи из США, Японии и Мексики продемонстрировали возможности генной терапии и в этом случае. С помощью CRISPR-Cas9 и гомологично-направленной репарации (то есть дополнительного введения в клетку одноцепочечной ДНК с «правильной» последовательностью гена, которая служит матрицей для редактирования), они исправили мутации гена COL7A1 в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках (ИПСК), полученных от двух пациентов с РДБЭ. У одного была гомозиготная мутация в экзоне 19, второй был гетерозиготным: в одном аллельном варианте COL7A1 у него присутствовала мутация в экзоне 19, в другом — в экзоне 32. Для первого удалось добиться 58%-ной биаллельной и 42%-ной моноаллельной коррекции, для второго — 19%-ной биаллельной и 48%-ной моноаллельной.

Из отредактированных ИПСК, дифференцированных в кератиноциты и фибробласты, получили так называемые трехмерные эквиваленты человеческой кожи и привили их иммунодефицитным мышам. У мышей после трансплантации нормально экспрессировался C7, через два месяца восстановились фибриллы заякоривания в базальной мембране. Нецелевого редактирования CRISPR-Cas9 выявлено не было.

Это исследование подтверждает, что применение тканевой инженерии в сочетании с редактированием гена может быть положено в основу терапии рецессивного дистрофического буллезного эпидермолиза; искусственно выращенный эквивалент кожи из трансгенных клеток, пересаженный на раневую поверхность, поможет закрытию незаживающих ран.