Моноклональное антитело защитило гуманизированных мышей от вируса Эпштейна — Барр

Вирус Эпштейна — Барр (ВЭБ) — это широко распространенный гамма-герпесвирус. После заражения может развиться инфекционный мононуклеоз. ВЭБ также связан с рассеянным склерозом, системной красной волчанкой, ревматоидным артритом и осложнениями COVID-19. ВЭБ — онкогенный вирус, который связан примерно с 358 000 новых случаев рака, что приводит к 209 000 смертей каждый год. Большинство видов рака, вызванных ВЭБ, возникают из эпителиальных клеток и В-клеток, то есть из клеток, которые ВЭБ поражает первыми, а также из места его репликации и латентного периода. Особенно опасен вирус для людей с ослабленной иммунной системой. Исследователи из США создали моноклональные антитела, которые препятствуют заражению ВЭБ.

ВЭБ использует гликопротеины gH, gL и gB для прикрепления к клеткам и проникновения внутрь. Заражение В-клеток инициируется прикреплением к рецепторам комплемента 1 (CD35) и (или) 2 (CD21) вирусного гликопротеина gp350 или сплайс-варианта gp220. Необходим еще и вирусный белок gp42, который образует трехсторонний комплекс с gH и gL. Связывание gp42 с HLA класса II на поверхности B-клеток приводит к запуску опосредованного gB слияния через комплекс gH/gL-gp42.

Нейтрализующие моноклональные антитела против gH/gL, gB, gp350 и gp42 при введении гуманизированным мышам до заражения ВЭБ могут предотвратить виремию, спленомегалию, ВЭБ-индуцированную лимфому и смерть в различной степени в зависимости от экспериментальной модели и антител. Аналогично, моноклональные антитела против gp350 и gH/gL могут защитить обезьян от экспериментального заражения ортологом ВЭБ, инфицирующим макак-резусов. Авторы пришли к выводу, что моноклональные антитела могут быть эффективным средством профилактики.

Исследователи использовали мышей ATX-GK от Alloy Therapeutics, которые вырабатывают генетически человеческие антитела. Им вводили рекомбинантные gp350 и gp42, получали гибридомы, после чего идентифицировали два нейтрализующих антитела против gp350 и восемь — против gp42 (ATX-350 и ATX-42).

Антитела ATX-350 не давали ВЭБ заражать Raji B-клетки. ATX-350-1 справлялись хуже, чем ATX-350-2, и оба эти антитела были менее эффективными, чем недавно описанные человеческие антитела 769A9 и 770E11. ATX-350-2 также препятствовали заражению эпителиальных клеток SVKCR2, в то время как ATX-350-1 не справлялись с этой задачей. Исследователи подтвердили, что антитела ATX-350 подавляют взаимодействие gp350 и CD21.

ATX-350-1 и ATX-350-2 соревновались за связывание gp350. Их эпитопы частично перекрываются. Также оба антитела закрывают сайт связывания CD21, но ATX-350-2 делал это лучше, что объясняет его лучшую нейтрализующую активность.

Восемь антител ATX-42 принадлежали к двум клональным линиям. ATX-42-1 связывал как gp42 сам по себе, так и gp42 в комплексе с gH/gL. ATX-42-2 связывался с gp42 с более высокой аффинностью. Все моноклональные антитела ATX-42 нейтрализовали инфекцию ВЭБ в клетках Raji B, при этом ATX-42-2 оказался наиболее эффективным. Но они не могли предотвратить заражение клеток SVKCR2. Антитела не давали gp42 связываться с HLA класса II, таргетируя их сайт связывания.

Исследователи проверили, могут ли выделенные антитела защитить гуманизированных мышей от ВЭБ in vivo. Следует отметить что эпителиальные клетки этих мышей не подвержены заражению ВЭБ. ATX-42-2, ATX-350-2 и контрольные антитела вводили внутрибрюшинно, затем заражали мышей вирусом. ATX-42-2 защитил пять из пяти мышей от спленомегалии. Все мыши выжили в течение 74 дней после заражения, однако на этом этапе одна мышь достигла критериев эвтаназии. У одной мыши на восьмой неделе наблюдалась проходящая виремия. В спленоцитах всех мышей группы ATX-42-2 отсутствовала обнаруживаемая вирусная ДНК.

Две из четырех мышей, получивших ATX-350-2, дожили до 74-го дня, и все имели нормальный вес селезенки на момент эвтаназии. Хотя ни у одной из мышей в группе ATX-350-2 не было виремии, вирусная ДНК была обнаружена в селезенке у двух из четырех мышей в этой группе.

Авторы измеряли уровни моноклональных антител в сыворотке крови в течение трех недель. Через сутки после введения моноклональных антител уровни ATX-42-2 в сыворотке крови были выше, чем уровни ATX-350-2. ATX-350-2 распадались быстрее, чем ATX-42-2, в течение первых двух недель. Благоприятные фармакокинетические профили ATX42-2, возможно, способствовали более эффективной защите, обеспечиваемой этими моноклональными антителами по сравнению с ATX-350-2.

Исследователи планируют и дальше развивать это направление. Нейтрализующие моноклональные антитела могут стать решением для пациентов с ослабленным иммунитетом.

Исследована ДНК вируса Эпштейна – Барр в биобанках геномов человека